PCR实验室设计的核心问题是如何避免污染。在实际工作中,常见的有以下几种污染类型:扩增产物的污染;**基因组DNA的污染;试剂的污染以及标本间的污染。由于一旦发生污染,实验必须停止,直到找到污染源为止,而且实验结果必须作废,需重新进行实验。所以发生污染后再围绕实验室来寻找污染源不但耗时而且繁琐,浪费人力物力。因此要避免污染,先应是预防,而不是排除。
PCR实验室平面布局
PCR实验室原则为4个单的工作区域,由扩增前区到扩增后区,且要严格分开。实验材料、试剂、记录笔、纸、清洁材料等,只能从扩增前区流向扩增后区,即从试剂制备区-样品制备区—扩增区—扩增产物分析区,不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流动到扩增后区,不得逆向流动。
各工作区域应设置缓冲间,工作间与缓冲间之间宜安装联锁装置。不同功能的核酸检验工作区应是分隔立的工作室,并有明显的标志,各区间不能直通。各区之间如果是紧密相连,需安装物品传递窗。每个工作区域的**部应安装紫外灯,紫外灯的波长为254nm。
实验室较为理想的布局模式为有一个走廊,试剂制备区,样品制备区,扩增区和产物分析区很规范的排列在一起。内实验室区域设为正压或常压状态,缓冲间内设为负压状态,使这三个区的空气流向由实验区域内向外,缓冲间内通向内实验室和走廊的门可安一种联锁装置,当一个门打开时,另一门必须关闭状态,防止出现两个门同时打开的情况。
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